)胚胎分割。
胚胎分割在很多国家都认为是“克隆”,但这并不是严格意义上的克隆。将未着床
的早期胚胎用显微手术的方法一分为二,一分为四或更多次地分割后,分别移植给受体
体内让其妊娠产仔。由一枚胚胎可以克隆为两个以上的后代,遗传性能完全一样。目前
用胚胎分割法已克隆出小鼠、家兔。山羊、绵羊、猪、牛和马等。
(2)胚胎细胞核移植。
胚胎细胞核移植技术要比胚胎分割技术进了一步。它是用显微手术的方法分离来着
床的早期胚胎细胞,将其单个细胞导入去除染色体的未受精的成熟的卵母细胞,经过电
融合,让该卵母细胞质和导人的胚胎细胞核融合、分裂、发育为胚胎。把该胚胎移植给
受体,让其妊娠产仔。目前知道的胚胎细胞核移植克隆的动物有小鼠、兔、山羊、绵羊、
猪。牛和猴子等。
(3)胚胎干细胞核移植。
将胚胎或胎儿原始生殖细胞经过抑制分化培养,让其细胞数成倍增多,但细胞不分
化,每个细胞仍具有发育成一个体的能力。把该单个细胞利用以上核移植技术,将其导
入除去染色体的成熟的卵母细胞内克隆胚胎,经移植至受体,妊娠、产仔、产生克隆动
物。
(4)胚胎嵌合。
把两枚胚胎细胞(同种或异种动物胚胎)嵌合,共同发育成为一个胚胎,称为嵌合
胚胎。再将该胚胎移植给受体,妊娠产仔。如该仔畜具有以上两种动物胚胎的细胞则称
之为嵌合体动物。如同类黑鼠和白鼠胚胎细胞嵌合,生下黑白相间的花小鼠。不同种的
绵羊和山羊胚胎细胞嵌合,可生下绵山羊,既有绵羊的特征,又有山羊的特征。目前嵌
合体动物有小鼠、大鼠、绵羊、山羊、猪和牛等;种间嵌合体动物有大鼠一小鼠嵌合体,
绵羊一山羊嵌合体、马一斑马嵌合体,牛一水牛嵌合体。
(5)体细胞核移植。
把动物体细胞经过抑制培养,使细胞处于休眠状态。采用以上核移植的方法,将其
导人去除染色体的成熟的卵母细胞克隆胚胎,经移植受体,妊娠产仔,克隆出动物。比
如克隆绵羊“多利”。它是从一只成年母绵羊的乳腺中取出一个本身并没有繁殖功能的
普通细胞,将这个细胞的基因分离出来备用;然后,再取出另一只母绵羊的未受精的卵
细胞,将这个卵细胞的基因取出,换上第一只母绵羊乳腺细胞的基因,再将这个基因已
被“调包”的卵细胞放电激活,使其开始像正常的受精卵那样进行细胞分裂;当细胞分
裂进行一定连阶段、胚胎已经形成后,再将这个胚胎植到第三只母绵羊,经过正常的妊
娠后产下“多利”。这项技术目前仅此一家获得成功。
克隆绵羊的诞生是生物工程技术发展史上的一个里程碑。它标志着生物学世纪提前
到来。克隆绵羊“多利”的问世突破了利用胚胎细胞进行细胞核移植的传统方式,可以
使科学家们拥有一项新的非常有效的技术,来深入研究一系列重要的生物学问题,在理
论上和应用上都具有重大意义
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